色譜柱是液相色譜的心臟，在液相色譜儀的使用中，保持色譜柱的柱效、容量和滲透粉性，延長(zhǎng)柱子的使用壽命非常重要。因此對(duì)液相色譜柱的維護(hù)是關(guān)鍵。因?yàn)闃悠分薪?jīng)常會(huì)含有能夠吸附在色譜柱固定相上的雜質(zhì)化合物，所以應(yīng)該經(jīng)常對(duì)色譜柱進(jìn)行清洗或沖洗。當(dāng)色譜柱在多次進(jìn)樣后顯示出柱效降低時(shí)，有必要采用適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相對(duì)色譜柱進(jìn)行處理，沖洗除去吸附在固定相上的污染物和樣品殘余物。
方法如下：
1.將色譜柱從系統(tǒng)上取下，反向連接到輸液泵上。色譜柱出口不要連接到檢測(cè) 器上，以免污染檢測(cè)器流動(dòng)池。
注意：大多數(shù)的硅膠基質(zhì)色譜柱反相沖洗沒有問題，但是聚合物基質(zhì)色譜柱并不能如此操作，在反相沖洗色譜柱之前后與色譜柱生產(chǎn)商確認(rèn)，反向沖洗流動(dòng)相流速不要太大。
2.沖洗溶劑的選擇要考慮分析的樣品和使用的流動(dòng)相條件，一般清洗流動(dòng)相強(qiáng)度應(yīng)該比流動(dòng)相更強(qiáng)，但是條件應(yīng)該盡可能的溫和。
A. 用適當(dāng)?shù)娜軇_洗色譜柱的鹽和強(qiáng)添加劑。
B. 用比分析流動(dòng)相更強(qiáng)的溶劑沖洗，該溶劑與流動(dòng)相組成相同但不含鹽和酸。
C. 如果認(rèn)為B沒能*清洗干凈色譜柱，用100％zui強(qiáng)溶劑沖洗。
在清洗色譜柱時(shí)，用與流動(dòng)相組成相同的溶劑，但是如果使用其他的溶劑，重要的是要考慮到溶劑之間的互溶性，另外不要用強(qiáng)酸和強(qiáng)堿。
下圖是采用不同洗脫能力的流動(dòng)相沖洗色譜柱時(shí)的色譜圖，可見色譜柱上的雜質(zhì)逐漸被洗脫下來。
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